一、效應(yīng)細(xì)胞的制備

激惹5天后，于無菌條件下取出受鼠引流的腹股溝淋巴結(jié)，100目鋼網(wǎng)研磨，調(diào)整細(xì)胞濃度為2×107.ml-1。臺盼藍(lán)色要求存活率>95%。

二、靶細(xì)胞的制備

P815細(xì)胞株系DBA/2小鼠的肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞株。連續(xù)傳代培養(yǎng)，調(diào)整細(xì)胞濃度為2×105/ml或3.33×105/ml（加入α-Lyt2 mAb時的靶細(xì)胞濃度），臺盼藍(lán)染色成活率>95%。

三、LDH釋放法測定CTL的功能

按表1加樣于96孔培養(yǎng)板中，設(shè)3個復(fù)孔。混勻置二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育4h。室溫離心，用微量加樣器每孔取上清液100μl，送全自動生化分析儀測定每孔的LDH含量。

表1　LDH釋放法測定CTL活性的加樣情況（μl）